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牛乳中乳糖含量測定

更新時(shí)間:2021-06-22      點(diǎn)擊次數:16097

乳制品牛乳中乳糖含量測定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長(cháng)發(fā)育的主要營(yíng)養物質(zhì)之一,對青少年智力發(fā)育十分重要,特別是新生嬰兒*的,在自然界中只有哺乳類(lèi)動(dòng)物的奶中含有乳糖,各類(lèi)植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類(lèi)和黏多糖類(lèi)的生成,因而對幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過(guò)測定牛乳中半乳糖的含量來(lái)計算牛乳中乳糖的含量。

 

2. 實(shí)驗

設備:

ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器

Agilent 1260 HPLC,C.01.07

試劑及耗材:

流動(dòng)相A:超純水

流動(dòng)相B:色譜純乙腈

色譜柱:Beksich糖柱,4.6*250mm,5um

(貨號:Bek445101

溫箱溫度:

30C

樣品:

牛乳樣品提取物

樣品預處理: 

樣品經(jīng)蛋白沉淀后,0.45um濾膜過(guò)濾后取上清液待上樣

進(jìn)樣體積:

20ul

按78%乙腈22%梯度比例進(jìn)行檢測,運行時(shí)間為20min

流動(dòng)相流速:

0.9ml/min

 

樣品檢測:

樣品配置好后置于自動(dòng)進(jìn)樣器中,使用編輯好的方法進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣分析

3. 結果

 ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器測定牛乳乳糖含量

結果見(jiàn)表1。

 1:乳糖定量檢測,*個(gè)峰為半乳糖

 

表2:半乳糖葡萄糖分離度拖尾因子情況

 

 3:半乳糖定量曲線(xiàn)

 

 R=0.99903

本次實(shí)驗的難點(diǎn)是樣品沒(méi)有紫外吸收,樣品水溶性強,需用乙腈稀釋?zhuān)?/span>半乳糖和葡萄糖不易達到基線(xiàn)分離。且ELSD3300運行參數如氣體流速和檢測溫度以及增益值必須優(yōu)化。

 

4. 結論

本方法使用ELSD3300測定了牛乳中半乳糖的含量,半乳糖和葡萄糖實(shí)現了基線(xiàn)分離,ELSD3300有平衡時(shí)間短,基線(xiàn)噪音小,重現性高和線(xiàn)性好等特點(diǎn)。

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